Это парные, довольно крупные, (около 1–2 см) железы, расположенные в преддверии влагалища в толще больших половых губ у их основания, выводные протоки открываются на внутренних поверхностях малых половых губ. Эти структуры тождественны бульбоуретральным (куперовским) железам у мужчин.
Бартолиновы железы выделяют слизистый секрет, который поддерживает влажность вульвы и входа во влагалище, что предотвращает раздражение и сухость при ходьбе, ношении белья и других механических воздействиях.

Их секреция зависит от физиологического состояния, гормонального фона и сексуальной активности. При сексуальном возбуждении железы активно выделяют прозрачную, вязкую слизь, которая уменьшает трение во время коитуса и защищает слизистую от микротравм.

Секрет Бартолиновых желёз содержит: воду, уже известный нам муцин, антибактериальные вещества (лизоцим, иммуноглобулины), помогающие предотвращать инфекции.

В отсутствие стимуляции железы выделяют 0.1–1 мл прозрачной слизи в сутки.
Во время сексуальной активности объем выделений резко увеличивается до 3–5 мл при возбуждении и до 10 мл во время оргазма (в смеси с влагалищным транссудатом).